Tubos
de agar soya-caseína (18-20 mL) fundido y enfriado a 45-50ºC
Frascos
de dilución con buffer fosfato pH 7.2
Baño
de María a 45-50ºC
Estufa
o incubadora
Contador
de colonias
PROCEDIMIENTO
1.
Transferir con una pipeta estéril, 10 mL de la muestra homogeneizada
por agitación, y añadirlos a un frasco de dilución que contiene 90
mL de buffer fosfato pH7,2 estéril. Agitar el frasco vigorosamente
(25 veces). Rotular 10-1.
2.
Transferir con una pipeta estéril, 10 mL de la dilución 10-1 a un
frasco de dilución con 90 mL de buffer fosfato pH 7,2 estéril.
Agitar. Rotular 10-2.
3.
Transferir con una pipeta estéril, 10 mL de la dilución 10-2 a un
frasco de dilución con 90 mL de buffer fosfato pH 7,2 estéril.
Agitar. Rotular 10-3.
4.
Con una pipeta estéril, transferir porciones de 1 mL de la dilución
10-1 a cada una de 2 placas de Petri estériles.
5.
Con una pipeta estéril, transferir porciones de 1 mL de la dilución
10-2 a cada una de 2 placas de Petri estériles.
6.
Con una pipeta estéril, transferir porciones de 1 mL de la dilución
10-3 a cada una de 2 placas de Petri estériles.
7.
Verter en cada una de las placas, 15 mL de agar soya caseína,
fundido y enfriado a 45ºC, mezclando cuidadosamente las muestras con
el agar. Dejar solidificar e incubar en posición invertida a 37ºC
por 48 horas.
Esquema
para la numeración de bacterias aerobias mesófilas.
RESULTADOS
Contar
el número de colonias en las placas usando el contador de colonias.
Calcular el número de microorganismos viables por mL de muestra,
expresado como unidades formadoras de colonias por mL (u.f.c./mL)
(ver Anexo de notación científica y diluciones).
Anotar
los resultados:
Número
promedio de colonias (seleccionar las placas que tengan entre 30 y
300 colonias por placa): _____________________
Factor
de dilución de las placas seleccionadas: _____________________
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